在紫外可见分光光度计中,光源负责提供足够强度且稳定的连续光谱。单色器则用于将光源发出的光分解为单色光,以便进行特定波长的测量。吸收池内放置待测样品,样品对特定波长的光进行吸收,未被吸收的光则通过检测器转化为电信号,进而由信号处理器进行处理和分析。
紫外可见分光光度计的工作原理基于分子中的某些基团在吸收紫外可见辐射光后发生电子能级跃迁,从而产生吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不同,因此每种物质都具有特有的、固定的吸收光谱曲线。根据吸收光谱上的特征波长处的吸光度高低,可以判别或测定物质的含量,这是分光光度定性和定量分析的基础。
使用紫外可见分光光度计进行测量时,需要遵循一定的操作步骤。首先,打开样品室盖,检查是否放置了遮光物,并确保仪器预热一定时间以达到稳定工作状态。然后,根据需要选择适当的光源和波长,并进行校准。在测量过程中,通常使用装有蒸馏水的吸收池进行调零,然后放入样品和参比样进行测试。最后,根据测试结果进行数据处理和分析。
现代紫外可见分光光度计还具备一些高级功能,如波长自动校准、自动设定和偏差自我修复等,这些功能提高了仪器的测量精度和稳定性。此外,一些仪器还采用插座式氘灯和钨灯设计,使得换灯过程更为简便,无需进行光学调试。
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