elisa是酶联接免疫吸附剂测定的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。
elisa实验步骤在检测时,受检B本与固相载体表面的抗体反应。洗涤后加入酶标记的抗体,通过反应结合在固相载体上。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与B本中受检物质的量直接相关,可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
elisa实验步骤样品收集、处理方法:
1、血清:使用不含热原和内D素的试管,操作过程中避免任何细胞C激,室温X液自然凝固10-20分钟,2000-3000rpm离心20分钟,将血清和红细胞迅速小心地分离,收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:根据B本的要求选择EDTA、Sodium citrate或Heparin作为抗凝剂。混合10-20分钟后,2000-3000rpm离心20分钟。收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
3、细胞上清液:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2000-3000rpm离心20分钟,收集上清。
4、组织匀浆:B本采集后用液氮迅速冷冻保存备用。使用时取适量B本,加入一定量的PBS,用手工或匀浆器将B本匀浆充分后,2000-3000rpm离心20分钟,收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
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